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甲乙型流感病毒核酸检测试剂盒

甲型流感病毒及乙型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)

 

 

产品简介:

通用名称:甲型流感病毒及乙型流感病毒核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)
英文名称:Diagnostic Kit for influenza A and influenza B Virus RNA (PCR-Fluorescence Probing)

注册证号:国食药监械(准)字2013第3401571号

 

适用范围:

本试剂盒用于定性检测人口咽拭子样本中甲型流感病毒或(和)乙型流感病毒RNA。

 

检验原理:
        本试剂盒利用实时荧光PCR检测技术,以甲型流感病毒M基因、乙型流感病毒NP基因中的高度保守序列为靶区域,设计特异性引物和TaqMan荧光探针,通过进行一步法RT-PCR扩增,在一个扩增管中实现对口咽拭子样本中的甲型流感病毒/乙型流感病毒的快速检测,并通过内标人β肌动蛋白(β-actin)和外标质控品(强阳性对照、临界阳性对照和阴性对照),对检测过程进行全程质量控制。本试剂盒设计的内标β-actin是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分,广泛存在于哺乳动物的组织或细胞中,表达稳定,不受细胞周期、药物作用或其他外因的影响。采集的人口咽拭子样本中含有人口腔上皮细胞,其中有稳定表达的β-actin存在。因此本试剂盒针对人源β-actin mRNA设计了特异性引物和Taqman探针作为试剂盒内标。
        本试剂盒组成包括核酸提取试剂、核酸扩增试剂和外标质控品三部分。其中核酸提取试剂组分包括核酸提取液A、核酸提取液B、核酸提取液C和样本稀释液。口咽拭子样本和外标质控品使用核酸提取试剂进行核酸提取,通过核酸扩增试剂(Inf.A/Inf.B/β-actin扩增反应液、Taq DNA 聚合酶、M-MLV反转录酶)进行扩增,并实时采集荧光信号,仪器软件系统自动绘制出扩增曲线。根据荧光背景信号确定阈值后,得到未知样本的阈循环值(Ct值),实现对未知样本的检测。

 

产品特点:

1、采集口咽拭子样本,减少病患痛苦;

2、采用Real-time PCR方法中的TaqMan探针法,技术成熟;

3、具有高灵敏度和高特异性;

4、本试剂盒采用了内标和外标两种标记监控试验过程(外标采用了强阳性对照、临界阳性对照和阴性对照,本试剂盒内标采用人源β-actin作监控目标),能很好的监控从样本提取到PCR的过程;

5、荧光信号检测,节约扩增时间,避免了后续开盖过程所引起的污染问题;

6、采用了多重荧光PCR技术,实现同时对甲型流感病毒/乙型流感病毒两种病原体进行检测并分型。

 

产品性能:
1、亚型检测能力:本试剂盒针对甲型流感病毒的季节性H1N1亚型、H3N2亚型、2009新型H1N1亚型、H5N1亚型、H7N3亚型、H9N1亚型、H7N9亚型以及乙型流感病毒的检测能力均经过实验室验证。
2、最低检测限(分析灵敏度):根据产品分析性能评估结果,与金标准方法――病原体细胞分离培养方法比较,本试剂盒针对甲型流感病毒(包括季节性H1N1亚型和H3N2亚型)和乙型流感病毒两种病原体检测下限,即半数细胞致死量TCID50分别为0.022和0.026;
3、分析特异性:本试剂盒与感染部位相似或者感染症状相似的其他病毒和细菌,如人3型/7型腺病毒、呼吸道合胞病毒B型、人副流感病毒1/2/3型、肠道病毒71型、柯萨奇病毒16型、肺炎支原体、肺炎衣原体、鼻病毒、人巨细胞病毒、人偏肺病毒、博卡病毒、人冠状病毒OC43/229E、人冠状病毒NL63/HKU1、EB病毒、流感嗜血杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、大肠杆菌、卡他莫拉菌、结核分枝杆菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌、唾液链球菌、化脓链球菌、脑膜炎奈瑟菌、百日咳杆菌、麻疹病毒等其它相关病原体均无交叉反应(以上病毒浓度为106pfu/ml以上,细菌为106 cfu/ml以上,肺炎支原体和肺炎衣原体为107copies/ml)。
4、精密度:对于由甲型流感病毒H3N2亚型毒株和乙型流感病毒毒株制备成的高、低两个浓度的精密度参考品进行检测,计算其变异系数(CV值)。批内精密度不大于5%,批间精密度不大于10%。
5、常见干扰物质,如血液、唾液、鼻分泌物在分别在10%时,不会对样本检测结果产生影响。但考虑上述干扰物质中的RNA酶的影响,仍提醒采样时应尽量避免上述物质的干扰。
6、检验样本中含有以下浓度的药物,不会影响到试剂盒对样本检测结果的判定:0.2mg/L倍氯米松、0.15mg/L地塞米松、12mg/L曲安西龙、0.4mg/L布地奈德、0.05 mg/L莫美达松、0.5mg/L氟替卡松、75mg/L苯佐卡因、5mg/L扎那米韦、37.5mg/L奥司他韦、75mg/L妥布霉素、50mg/L金刚烷胺、75mg/L硫磺、150mg/L金英、50mg/L盐酸金刚乙胺、0.125mg/L肾上腺素、25mg/L薄荷脑、0.05%羟甲唑啉、500mg/L氟尼缩松、500mg/L莫匹罗星。

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